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在生物細胞的世界里，膜蛋白是一個不可或缺的角色。它們不僅參與細胞的識別、信號轉導和物質運輸等重要功能，還成為了**研發的重要靶點。動物細胞的膜脂主要有9種，而膜蛋白的種類繁多，雖然多數膜蛋白分子數量較少，但它們賦予了細胞膜至關重要的生物學功能。
根據與脂分子的結合方式和分離難易程度，膜蛋白主要分為外在膜蛋白和內在膜蛋白兩大類。

1）外在膜蛋白為水溶性蛋白，通過離子鍵或其它較弱的鍵與膜表面的蛋白質分子或脂分子結合。因此，通過改變溶液的離子強度或提高溫度，就可以輕松地從膜上分離出來，而不會破壞膜的結構。

2）內在膜蛋白與膜結合非常緊密，一般只有用去垢劑(detergent)使其膜解后才可分離出來。


膜蛋白提取方法：

1)膜蛋白色譜(Chromatography of Membrane Protein,CMP)：CMP分離強疏水性蛋白、多肽混合物的層析系統，一般有去垢劑（如SDS）溶解膜蛋白后形成SDS-融膜蛋白，并由羥基磷灰石為固定相的柱子分離純化。羥基磷灰石柱具有陰離子磷酸基團（P-端），又具有陽離子鈣（C-端），與固定相結合主要決定于膜蛋白的大小、SDS結合量。利用原子散射法研究cAMP的分離機制發現，樣品與SDS結合后在離子交換柱上存在SDS分子、帶電荷氨基酸與固定相中帶電離子間的交換，從而達到分級分離的目的。
2)順序抽提法：根據細胞蛋白溶解性的差異，用具有不同溶解能力的蛋白溶解液進行抽提的方法。用Tris堿溶液裂解細胞提取高溶解性蛋白；把未溶解的沉淀用標準液溶解提取高疏水性蛋白；**用含復合表面活性劑的蛋白溶解液，可以再次抽提前兩次抽提后不能溶解的膜蛋白。
3)離心蛋白提取法（centrifugal protein extraction）
原理：高滲的蛋白裂解液讓細胞溶脹破裂后，超高速離心
4)detergent-based：提取時先用裂解液裂解胞膜（選用不同的去污試劑是關鍵），梯度離心分離細胞器(ER)，然后分級抽提方法。例如，去掉細胞器之后的DEBRIS就是核膜，再裂解得到核膜蛋白。而膜蛋白是裂胞膜時不溶的部分。
總的感受：細胞的量要很充足。之后的定性鑒定常用的方法有雙向免疫擴散、免疫電泳及聚丙稀酰胺凝膠電泳等。純化蛋白質濃度的定量測定可用雙縮脲法、酚試劑法或紫外光吸收法定量鑒定膜蛋白，方便迅速。

除了上述的提取方法，還有其他一些方法可以用于提取膜蛋白。例如，可以采用超聲波破碎法或反復凍融法來破壞生物膜的結構，從而使膜蛋白釋放出來。此外，還可以使用一些特殊的分離技術，如超離心或凝膠電泳，來分離和純化膜蛋白。

值得注意的是，不同的膜蛋白具有不同的性質和穩定性，因此需要采用不同的提取方法。在選擇提取方法時，需要考慮的因素包括目標膜蛋白的分子量、溶解度、穩定性以及生物膜的組成和性質等。

總之，提取和純化膜蛋白是一項具有挑戰性的任務，需要綜合考慮多種因素。通過對不同方法的了解和比較，我們可以根據實際需求選擇合適的方法來提取和純化目標膜蛋白，為進一步的研究和應用奠定基礎。

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資訊來源：義翹神州